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Germinación in vitro

Tema en 'Semilleros, injertos y esquejes de cactus' comenzado por valpit, 7/9/15.

  1. valpit

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    Por cierto, que tal van las lithops?? germinan bien?

    La verdad todo esto lo he estado haciendo a prueba y error, porque me encontré todo este material en el laboratorio donde trabajo, pues hace años como hobbie germinaban orquídeas in-vitro, pero ya no laboran aquí estas personas y dejaron todo el material así que me puse manos a la obra para buscar una buena composición y ver si funcionaba.
  2. manuelantonio

    manuelantonio

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    hola valpit eres químico o biólogo? yo soy químico. el medio lo conozco, al igual que tu antes se hacían pruebas de germinación in vitro pero se abandono y los materiales como los reactivos fueron llevados al laboratorios de fisiología vegetal. y el proceso es muy similar al de las orquideas. he querido hacerlo para ver como me va pero el tiempo entre los muestreos de aguas y suelos no me dejan espacio así como las clases con los chicos. por ejemplo me hubiera gustado probar con lagunas semillas mejor de acá, en algunos intercambios que he hecho por ejemplo con semillas de epithelanta micromeris que por fin las había conseguido, los sembré en un medio pero usando como gelificador gelatina sin sabor y color, ya han pasado mas de tres meses y ni una nació a pesar que el frasco no se contamino lo cual me di por vencido, pero probare nuevamente como has hecho tu. gracias por las clases. cuidate
    mari6 da las Gracias.
  3. valpit

    valpit

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    Pues una mezcla de ambos, Quimico Farmacobiólogo.

    Si de hecho yo desde que estaba en la facultad empecé a hacer experimentos hará mas de 5 años, la verdad no tenía acceso a nada de lo que tengo ahorita, asi que todo lo trabaje en casa, esterilizaba en olla de presión, compre agar en una tienda naturista y el medio de cultivo lo hice como vi los tutoriales para orquídeas con tomates y plátano y más cosas pero ya te imaginaras el fracaso total jaja lo único que conseguí fueron unas hermosas colonias de hongos.

    Tuve la suerte que al laboratorio donde llegue a trabajar el hermano del dueño (biólogo) junto con otro trabajador de aquí compraron todo lo necesario para hacer los medios, pero se fué a hacer un doctorado y dejó todo olvidado hasta que lo encontré entre cosas que iban a tirar, así que mejor me puse a utilizarlos.

    Lo de las semillas primero me aseguré que fueran viables, por eso una parte las germiné de manera tradicional, ya que vi que tenían buen porcentaje de germinación lo pase a cultivo in vitro.
    Con otro conocido ing. agrónomo me dijo que probablemente quemé las semillas de Astrophytum con el alcohol al 70, que mejor utilizara algo así como al 40 o 50% pero que aumentara el tiempo de exposición, pero como me quedé sin semillas de astros para experimentar, mejor seguí con las que tengo de sobra.

    Hay otra forma de sanitizarlas, venden una mezcla de antibiótico-antimicótico (Estreptomicina/PenicilinaG) que se podría utilizar para sumergir las semillas. Yo lo agrego al medio antes de que solidifique como al 0.5% para evitar que se contamine.

    Para gelificarla puedes usar agar-agar del que venden en tiendas naturistas, o incluso agarosa con los que se hacen los geles de electroforesis, sino mal recuerdo al 0.7% queda lo suficientemente blando, pero mejor el agar.
    mari6 da las Gracias.
  4. valpit

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    Saludos a todos.

    Esta semana me dí a la tarea de hacer "repiques" de las Mammillarias y los Melocactus que ya estaban bastante apretados en esos tubitos, como experimento funciono bien la germinación, pero ya que crecían les faltaba espacio así que prepare nuevamente medio y lo puse en unos pequeños frascos de guerber.

    Así quedaron, ya bien distribuidos y creciendo cada quien con más espacio.
    Una disculpa por la calidad de las fotografías pero el vidrio del frasco me jugo mal con el enfoque.

    Mammillarias:
    [​IMG]

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    Aquí se alcanza a apreciar un poco la raíz, como de unos 5mm

    Melocactus:
    [​IMG]

    [​IMG]
    mari6 da las Gracias.
  5. manuelantonio

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    hola valpit, interesante expere4incia felicidades por contarnos un poco sobre ello. las fotos estan geniales para mi, las semillas germinadas de melos estan maravillosas. que tipo de melos son? otra pregunta cuanto tiempo esperas para repicar? gracias
    valpit da las Gracias.
  6. valpit

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    @manuelantonio Que tal. Es un Melocactus curvispinus, al menos así me las enviaron

    Pues verás las puse a germinar el 11 de Agosto de éste año, hice el repique porque ya estaban mucho muy apretadas en ese tubito, incluso había unas que germinaron y tenían la raíz por fuera, fué mas bien hasta que vi que no cabían. El problema del repique es que se puede dañar un poco la raíz.
  7. valpit

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    Hoy decidí intentar el explante de las primeras germinaciones a un sustrato orgánico para comenzar aclimatación.

    Tomé estos viales que les mostré en un principio y con pinzitas y mucho cuidado sacarlos del agar
    [​IMG]

    Y quedaron estos pequeñines
    [​IMG]
    [​IMG]

    El sustrato es el que utilizo normalmente para germinar cactus, tiene un poquito más de peatmoss para incrementar la humedad.

    [​IMG]

    El resultado
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    En rojo les muestro las 3 Mammillarias que quedaron que no trasvasé a los frascos guerber.
    En verde están 2 Melocactus que se cayeron cuando hacía ese trasvase del 10 de octubre y los pasé a un semillero que tenía, al ver los buenos resultados hice esta aclimatación.
    El resto son los Melocactus que quedaron en los viales.
    [​IMG]


    Por supuesto los más grandes los trasvase individualmente a recipientes con medio fresco.

    Astrophytum myrostigma, fueron germinados el día 30/julio/2015 al ver que no crecían más los cambié de recipiente.
    [​IMG]
    [​IMG]

    Melocactus. El segundo ya se le notan aún mas las espinas y toma una coloración rojiza.
    [​IMG]
    [​IMG]

    Hasta luego
    Ricardo Rabell y mari6 dan las Gracias.
  8. valpit

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    Tengo bastante abandonado mis post. No he tenido tiempo desde diciembre en el trabajo (ahora si he tenido)

    En fin, me encontré con el problema que el medio de los invitro se estaba resecando debido a que los de tapa de rosca dejan escapar humedad y el problema es que la raíz ya estaba al descubierto. Entonces por fin ayer en un rato libre me di a la tarea de cambiar a medio más fresco a los que ya se les estaba secando y sacar a unos cuantos de los que se estaban amontonando.

    Muestro imágenes:
    Éste es el mismo Melocactus de la imágen anterior del día 29/oct... es sorprendente lo que creció. Como podrán ver ya no había medio entre la raíz y de hecho el cactus ya no cupo por la boca del frasco, tuve que romperlo para sacarlo.
    [​IMG]

    En su nuevo ambiente:
    [​IMG]

    Ahora estos dos Astrophytum que prácticamente no han crecido tanto
    [​IMG]

    Los coloqué a cada quien en un vial nuevo
    [​IMG]

    Los viales con bastantes plántulas de Mammillaria y Melocactus los trasplante los más grandes o los que se habían roto de la raíz a frascos individuales

    Melocactus
    [​IMG]

    Mammillarias
    [​IMG]

    Y como eran bastantes me quede sin frascos pequeños, así que estas las deje donde estaban, con mas espacio. Se nota que a los melocactus les gustó más el ambiente pues crecieron muchisimo más rápido que las mammillarias
    [​IMG]
    antnio, JotaErre y miguel rodriguez dan las Gracias.
  9. miguel rodriguez

    miguel rodriguez me encantan los cactus!!!

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  10. antnio

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    Estupenda informacion. Gracias
  11. valpit

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    Retomo mi post un poco abandonado por falta de tiempo e intentos.

    Éstas fueron mis últimas germinaciones, sigo aún teniendo problemas para encontrar la proporción correcta de agarosa para que no quede tan rígido el gel.

    Ferocactus latispinus 15/Sept/2016
    Como podrán ver bastante apretados y por el tipo de recipiente no se pudieron establecer adecuadamente

    [​IMG]

    Incluso hubo quienes se desarrollaron en las paredes con la pura humedad generada en el tubo.

    [​IMG]

    Así que por fin me apiade de éstos plantines con tantas ganas de crecer que mejor hago el paso de in vitro a ex vitro, las pasaré a un sustrato para que se acondicionen y aclimaten a un nuevo ambiente

    [​IMG]
    [​IMG]

    Una comparativa de qué tanto logro penetrar el medio de cultivo la planta que mejor se desarrolló contra un cerillo.
    [​IMG]

    Pronto seguiré haciendo nuevos intentos
  12. Kennethmacron

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    excelente info, un saludo!
  13. Karel

    Karel Adoro los cactus y plantas crasas

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    Muy interesante, si injertas los cactus más grandes te ahorrarás la difícil transición de ellos a un sustrato ex vitro. En mi trabajo tenemos pensado montar un laboratorio para cultivo in vitro en un futuro. Pero los medios no los venden a la población, es decir, no puedo hacer nada en casa
  14. valpit

    valpit

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    Pues depende de cuál sea el objetivo que sigas, el principal objetivo de hacer los cultivos in vitro es el de propagar por callosidades, es decir cortar la planta germinada y con hormonas hacer un cuerpo calloso que te de una planta nueva y por así decirlo, de una planta germinada obtener 3 clones, que posteriormente puedas injertar para acelerar el crecimiento.

    Como no me dedico a ésto más que de hobbie y mientras tenga material disponible, me topo con el problema que una vez germinadas no se que hacer con ellas, no tengo suficientes pies de injerto como para ponerlas todas, así que mejor las paso a sustrato y la dejo como un semillero normal.

    Lo ideal es usar un sustrato previamente esterilizado y con una humedad del 100% para irla bajando gradualmente.
    Después subo foto de como va la aclimatación de los Ferocactus
    Karel da las Gracias.
  15. valpit

    valpit

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    A casi un mes de la transición a sustrato, no ha habido pérdidas por podredumbre, los rocié por si las dudas con un antifúngico a los dos días. El único problema que hubo fué que se volteó el recipiente y tuve que repicar nuevamente.

    [​IMG]